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2、也叫初代培养。这个阶段的任务是选取母株和外植体进行无菌培养，以及外植体的启动生长，利于离体材料在适宜培养环境中以某种器官发生类型进行增殖。该阶段是植物组织培养能否成功的重要一步。选择母株时要选择性状稳定、生长健壮、无病虫害的成年植株；选择外植体时可以采用茎段、茎尖、顶芽、腋芽、叶片、叶柄等。

3、外植体确定以后，进行灭菌。灭菌时可以选择用次氯酸钠、氯化汞，时间控制在8～15分钟，清水冲洗3～5次，然后接种在启动培养基上。

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4、增殖培育阶段的芽苗有时没有根，这就需要将单个的芽苗转移到生根培养基或适宜的环境中诱导生根。这个阶段的任务是为苗木移栽作准备，此时培养基中需降低无机盐浓度，减少或去除细胞分裂素，调整生长素的浓度。

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